10xGenomics单细胞转录组测序

10x Genomics 单细胞转录组测序技术解析

技术简介

单细胞水平高通量基因表达谱分析，可实现对复杂细胞群体的深度解析，精准表征单个细胞的基因表达特征。该技术支持同步检测 CRISPR 干扰靶点与细胞表面蛋白，能够有效规避单细胞异质性生物学信息被细胞群体均质化效应掩盖的问题，助力挖掘细胞群体中潜藏的精细生物学差异。

核心技术优势

无需微量扩增步骤，从源头降低假阳性率，保障基因表达数据的真实性与可靠性。

实现真正意义上的单细胞水平测序，双细胞率（Doublet rate）低至 0.9%/1000 个细胞，大幅提升单细胞数据的纯度。

建库通量灵活可调，可一次性完成 100～80000 个细胞的建库工作，显著提高实验效率，适配不同规模的研究需求。

单细胞体系制备流程高效便捷，7 分钟内即可完成，细胞捕获效率高达 65％，兼顾实验速度与样本利用率。

适用研究领域广泛，覆盖生命科学多个方向，且项目周期短，能快速输出高质量研究结果。

实验注意事项

样本制备

样本需保证新鲜度与高活性，严禁反复冻融。组织解离环节需严格把控酶解时间与温度，防止细胞过度消化或团聚；制备的单细胞悬液浓度需控制在 700–1200 cells/μL，活细胞比例不低于 80%，同时确保悬液无细胞碎片、死细胞等杂质污染。

实验操作

需严格遵循 10x Genomics 标准实验流程开展操作，重视试剂的保存条件与使用期限，实验过程中避免产生气泡，防止影响微流体系统的正常运行。进行油包水反应时，需精准调控各组分比例，确保每个凝胶珠乳液（GEMs）仅包裹单个细胞，保障单细胞测序的准确性。

数据分析

选用适配的专业分析工具，如 Cell Ranger、Seurat 等，并结合研究需求合理设置参数（如预期细胞数）。鉴于单细胞测序数据量庞大，需配备充足的计算资源与存储容量。分析过程中需根据实验目的筛选关键细胞亚群，重点关注批次效应，必要时开展数据整合与标准化处理，以获得可靠的分析结论。

以上涵盖了 10x Genomics 单细胞转录组测序的关键要点。若你还想了解某一环节的详细内容，或有其他需求，欢迎随时告知。