应用简介
裸鼠皮下荷瘤是一种将人源或鼠源肿瘤细胞注射至免疫缺陷裸鼠皮下,通过施加药物或其他干预条件,验证目标细胞成瘤及转移能力的实验技术。裸鼠肿瘤模型是肿瘤学、免疫学研究,以及药品与生物制品安全性评价、有效性筛选等领域的重要研究基础。
裸鼠皮下成瘤模型
裸鼠属于免疫缺陷型小鼠,基于这一特性,可将肿瘤细胞移植于其皮下或体内。由于不会被小鼠免疫细胞杀伤,移植的肿瘤细胞能够摄取裸鼠机体营养完成生长与转移进程。借助该模型,可开展肿瘤细胞在体成瘤能力检测、药物对肿瘤细胞杀伤活性评估等相关研究。
实验方法

技术总结
裸鼠荷瘤实验操作需重点关注以下要点:
细胞状态对成瘤效果影响显著,开展荷瘤实验前,需确保细胞处于良好活性状态,注射的细胞数量一般不低于 1×10?个。
裸鼠虽存在免疫缺陷,但并非完全无排异反应,实验通常选用周龄不超过 7 周的裸鼠,周龄过大易降低成瘤效率。
注射位点的选择具有一定技术要求,优先选择裸鼠腋下部位注射,该区域血流丰富,有利于肿瘤在短期内形成。
问题解答
瘤子长不出来是怎么回事?一方面可能是细胞状态不佳、活力低下,或所选肿瘤细胞系本身成瘤难度较高,可通过添加基质胶(Matrigel)辅助成瘤、增加细胞接种量,或更换成瘤性更强的细胞系解决;另一方面可能是实验裸鼠周龄偏大,或存在免疫排斥反应,建议更换免疫缺陷程度更高的小鼠品系(如 Nod-scid 小鼠、NOG 小鼠,其免疫缺陷程度优于 Nude 裸鼠)。
小鼠瘤子长起来又消失?肿瘤块先缩小后增大的现象较为常见,大概率是机体产生炎症反应,导致肿瘤细胞被裸鼠自身吸收。可继续观察,若肿瘤细胞被吸收后数周仍未再次生长,建议更换实验小鼠。
均一性很差,肿瘤体积差距较大?荷瘤分组实验中,若小鼠间肿瘤体积差异显著,多由实验裸鼠周龄不一致、接种细胞数量不均等因素导致,建议重新规划实验分组并开展实验。
是否可以在一只小鼠进行多个点荷瘤?不建议在单只小鼠身上设置多个接种点。多个肿瘤块共存时,可能会相互干扰,影响实验结果的准确性。
是否应用免疫抑制剂加速肿瘤生长?若裸鼠荷瘤后肿瘤生长停滞,可参考相关文献,使用环磷酰胺等免疫抑制剂(可抑制裸鼠 NK 细胞活性)促进肿瘤生长。但不建议为缩短造模周期而盲目使用免疫抑制剂,此类药物可能导致肿瘤组织溃烂,迫使实验中止。一般情况下,应遵循细胞系自身的生长特性,减少不必要的人为干预。
如果荷瘤分组发现小鼠肿瘤体积差距很大,这可能跟小鼠周龄及接种细胞量不一致导致,建议重新做实验分组。
▲是否可以在一只小鼠进行多个点荷瘤?
不可以,一只老鼠就只能接种一个点。因为一个老鼠身上有多个肿瘤块的情况下,可能会相互影响。
▲是否应用免疫抑制剂加速肿瘤生长
如果裸鼠荷瘤不生长,可以参考文献,用免疫抑制剂如环磷酰胺(抑制裸鼠NK细胞活性)促进生长;不过最好不要为了缩短造模周期来加速生长,因为可能会造成溃烂,这样就不得不中止实验。所以一般情况下,应尽量符合细胞系本身的生长特性,不应过多地人为的干扰。
