番红固绿染色

番红-固绿染色

在关节软骨及软骨下骨相关形态学研究中，常需联合多种染料以清晰显示组织学结构。其中，始于20世纪60年代的番红O（safranin O）-固绿（fast green）染色法，因能直观呈现关节软骨、软骨下骨及骨组织的形态结构而被广泛应用。该染色法可使软骨呈红色，成骨组织呈绿色。

技术原理

番红-固绿（软骨）染色法的核心原理的是：嗜碱性的软骨组织可与碱性染料番红O结合，呈现红色；嗜酸性的骨组织则与酸性染料固绿结合，呈现绿色或蓝色，与红色软骨形成鲜明对比，从而实现软骨组织与骨组织的清晰区分。

番红O属于可结合多阴离子的阳离子染料，其对软骨组织的显色机制是阳离子染料与多糖中的阴离子基团（如硫酸软骨素、硫酸角质素）发生结合。番红O的着色深度与阴离子浓度大致成正比，可间接反映基质中蛋白多糖的含量及分布情况。当软骨受损时，软骨内糖蛋白会释放，导致基质成分分布不均，进而使番红O染色变浅或无着色。借助图像分析软件，可对番红O染色的软骨基质进行定量分析。固绿可与胶原纤维牢固结合，且不易褪色。

实验步骤

实验结果展示

＜番红固绿-骨＞

注意事项

1. 控制固绿上色程度，避免番红染色掩盖绿色。

2. 切片分化时间需适宜，以背景呈绿色为准。分化过度易导致切片不着色，分化不足则易造成切片着色过深。

送样运输要求

1. 植物样本需置于20倍样本体积的FAA固定液中固定24小时以上，再常温运输送样。

2. 严禁冷冻结冰。